对于什么是总抗氧化能力,相信很多人无法清楚表述。
总抗氧化能力是指一个体系中大小分子和酶总和的水平,也就是抗氧化自由基,就代表该体系的总抗氧化能力。目前有多种方法可以检测,我们下面一一讨论。
那为什么要总抗氧化能力呢?怎样量化总抗氧化能力这个参数呢?
首先回答第一个问题,越来越多的研究显示抗氧化是预防衰老的重要步骤,因为自由基或氧化剂会将细胞和组织分解,影响代谢功能,并会引起不同的健康问题。如果能够消除过多的氧化自由基,对于许多自由基引起的及老化相关疾病都能够预防。例如常见的癌症、动脉硬化、糖尿病、白内障、心血管病、老年痴呆、关节炎等,这些疾病都被认为与自由基相关。
研究抗氧化能力,可以有效克服其所代理的危害,为人类身体健康带来重大突破,所以被化妆品企业、保健企业以及饮料食品企业还有生命科学届所关注。
3. 第二个问题,我们该怎样量化总抗氧化能力这个参数,用什么方法来测试?FRAP法、电化学法、e-BQC电化学总抗氧化能力测试法。
1.FRAP法
是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma(FRAP)方法,对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的方法。植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱,可以用于筛选强抗氧化能力的药物。
FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric- tripyridyltriazine (Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ,随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。
Antioxidant
Fe3+-TPTZ ——————> Fe2+-TPTZ (蓝色)
由于反应在酸性条件下进行,可以抑制内源性的一些干扰因素。并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10μM,因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰FRAP法的检测反应。由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的,样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显著影响检测反应。
2.ORAC法
ORAC分析是指对的抗氧化能力的测定中,在各种类型的,如食品和生物样品。荧光指示剂和自由基产生剂一起使用。激活自由基产生剂时产生的自由基会损坏指示器,从而失去其性能。这可以在荧光计中检测为信号的减少。
当您将富含抗氧化剂的样品添加到该混合物中时,抗氧化剂可以保护探针,并且降低荧光的速度。
该测量通常需要较长的时间(例如一个半小时)进行,因此您可以检测到具有不同动力学的抗氧化剂,第一种起作用的抗氧化剂和第二种耗尽后的第二种抗氧化剂,依此类推。见下图:
4. 电化学法
北京汇百川科技有限公司引进西班牙Bioquochem公司厂生产的e-BQC总抗氧化能力测试仪,采用电化学方法,e-BQC是一种便携式设备,基于电化学原理,配合一次性使用测试卡,仅需一滴样品就可在一分钟内给出准确数据。
E-BQC总抗氧化能力测试仪原理:
该设备测量待氧化样品的电阻,该电阻转化为抗氧化能力。在电化学中,抗氧化剂是在低电位下被氧化的物质,因此可以保护在较高电位下被氧化的其他生物分子:脂质,蛋白质和DNA。
e-BQC如何衡量?
它通过施加可变电位来氧化样品。将可变电压施加到试纸上以“激活”抗氧化剂,因此它们会将电子割让。电子被释放并在电极处被检测为电流。
结果是什么意思?
结果以能够赠予自由基以中和样品中电子的电子总电荷(uC)形式给出。
研究实验室:
TAC测量的传统方法是实验室测试。这些是基于自由基类型的产生以及样品中存在的分子消除这些自由基的能力。这些测定法与电化学法几乎没有可比性。
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